掌握超濾離心管正確使用方法是保障實驗成功的關鍵
點擊次數：82 更新時間：2025-12-01
超濾離心管是一種集離心與膜分離技術于一體的實驗室耗材，廣泛應用于蛋白質濃縮、脫鹽、緩沖液置換、核酸純化及小分子去除等生物化學操作。其核心為內置特定截留分子量的超濾膜，通過離心力驅動樣品透過膜孔，實現目標分子的高效分離。然而，若操作不當，易導致膜堵塞、樣品損失、回收率低甚至管體破裂。掌握其正確使用方法，是保障實驗成功的關鍵。
一、使用前準備
按分子量精準選膜：目標大分子應大于MWCO的2–3倍，小分子雜質小于1/2MWCO，確保有效截留與透過；
潤濕膜面（必要時）：對疏水性膜（如PVDF），先加入少量緩沖液或乙醇潤濕5分鐘，再離心去除，避免氣阻影響流速；
檢查管體完整性：確認濾膜無破損、管蓋密封圈完好，避免離心泄漏。
二、樣品加載規范
控制上樣體積：通常不超過離心管最大容量的75%（如15mL管加樣≤11mL），預留濃縮空間；
預澄清處理：含顆粒或細胞碎片的樣品需先低速離心（如3,000×g，5min）或過濾，防止膜孔堵塞；
避免高粘度或高濃度直接上樣：可適當稀釋，提升初始通量。
三、離心參數設置
參照廠家推薦轉速：通常3,000–5,000×g，嚴禁超速（查看管壁標注的最大RCF值）；
設定合適時間：分階段離心（如每次10–15分鐘），觀察濃縮液體積，避免干膜；
低溫操作：對熱敏蛋白，使用4℃冷凍離心機，防止變性。
四、濃縮與洗滌操作技巧
緩沖液置換：當濃縮至約100–200μL時，加入等體積新緩沖液，混勻后再離心，重復2–3次可去除＞95%小分子雜質；
避免膜干涸：濃縮終點保留至少50μL液體，干膜將不可逆降低回收率；
輕柔混勻：用移液器緩慢吹打，勿劇烈震蕩損傷大分子。
五、回收與清潔（若為可重復使用型）
多數超濾離心管為一次性設計，但部分型號可重復使用；
使用后立即用去離子水沖洗，再用0.1MNaOH或專用清洗液浸泡，去除殘留；
嚴禁高壓滅菌或烘干，以免膜結構變形。
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